medparasitologyМедицинская паразитология и паразитарные болезниMedical Parasitology and Parasitic Diseases0025-83262713-1777Научно-образовательный паразитологический центр им. П.Г. Сергиева10.33092/0025-8326mp2026.21-28medparasitology-126Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESОпределение специфических антител к Toxocara canis у человека методом иммунохроматографического анализаDetermination of specific antibodies to Toxocara canis in humans by immunochromatographic analysisКанинаИ. В.KaninaI. V.

Рязань

Ryazan

НовакМ. Д.NovakM. D.

Рязань

Ryazan

НовакА. И.NovakA. I.

Рязань

Ryazan

ЕвдокимоваО. В.EvdokimovaO. V.

Рязань

Ryazan

Рязанский государственный медицинский университет имени академика И. П. ПавловаRyazan State Medical University named after academician I. P. Pavlov202616052026012128Copyright © Научно-образовательный паразитологический центр им. П.Г. Сергиева, 20262026Научно-образовательный паразитологический центр им. П.Г. СергиеваНаучно-образовательный паразитологический центр им. П.Г. Сергиеваhttps://www.medparasitology.com/jour/about/submissions#copyrightNoticehttps://www.medparasitology.com/jour/article/view/126

В статье описан способ получения иммунореагентов для серологической диагностики токсокароза человека методом иммунохроматографического анализа. Разработана тест-система для серологического скрининга популяции на токсокраоз иммунохимическим методом с использованием экскреторносекреторных антигенов личинок токсокар (патент №2834042 от 16.03.2023 RU). Предварительное получение образцов антигенных препаратов производилось путем оптимизирования условий культивирования личинок Toxocara canis с последующим получением антигена по согласно собственной методике. Высокоиммунные сыворотки в качестве иимунореагента получали от гипериммунизированных животных собственным антигенным препаратом в сочетании с адъювантом Фрейнда. При разработке тест-системы учитывали цель скрининга – определение антигенов или антител в исследуемом материале. С целью апробации иммунохроматографической тест-системы исследованы образцы сывороток крови клинически здоровых добровольцев (n=154). Согласно полученным результатам в 9 из 109 (8,2%) случаев среди взрослых людей и в 4 из 45 (8,8%) детских образцов сывороток выявлены антитела к токсокарам визуально наблюдаемые в виде поперечных темно-синих полос в тестовых зонах. Специфичность экспресс-теста подтверждается сходством результатов исследования в ИФА Воспроизводимость экспресс-теста демонстрирует точность методики, стабильность используемых компонентов и возможность ее использования в коммерческом производстве.

The article describes a method for obtaining immunoreagents for the serological diagnosis of human toxocariasis by immunochromatographic analysis. A test system has been developed for serological screening of the population for toxocariasis by an immunochemical method using excretory-secretory antigens of Toxocara larvae (patent No. 2834042 dated 03/16/2023 RU). Preliminary preparation of antigenic drug samples was carried out by optimizing the cultivation conditions of Toxocara canis larvae, followed by antigen production according to their own methodology. Highly immune sera as an immunoreagent were obtained from hyperimmunized animals with their own antigenic preparation in combination with Freund's adjuvant. When developing the test system, the purpose of screening was taken into account – the detection of antigens or antibodies in the test material. In order to test the immunochromatographic test system, blood serum samples from clinically healthy volunteers (n=154) were examined. According to the results, in 9 out of 109 (8.2%) cases among adults and in 4 out of 45 (8.8%) children's serum samples, antibodies to toxocars were visually observed in the form of transverse dark blue bands in the test zones. The specificity of the rapid test is confirmed by the similarity of the results of the ELISA study. The reproducibility of the rapid test demonstrates the accuracy of the methodology, the stability of the components used, and the possibility of its use in commercial production.

токоскарозиммунохроматографияиммуногеагентыэкскреторно-секреторный антигендиагностикаэкспресс-тесттест-системаtoxocariasisimmunochromatographyimmunoreagentsexcretory-secretory antigendiagnosticrapid testtest systemИсследование дополнительного фианасирования не имело.ReferencesДавидянц В.А., Черникова Е., Лунгу В. Контроль и профилактика геогельминтозов в странах Европейского Региона ВОЗ. Сборник справочно-методических материалов. ВОЗ; 2017:5669. ISBN 978 92 890 5242 9Davidyanc V.A., CHernikova E., Lungu V. Control and prevention of geohelminthiasis in the countries of the WHO European Region. A collection of reference and methodological materials. VOZ; 2017:5669. ISBN 978 92 890 5242 9.Ma G., Holland C.V., Wang T. [et al.]. Human toxocariasis. Lancet Infect Dis. 2018;18(1):14–24. DOI: https://doi.org/10.1016/S1473-3099(17)30331-6.Ma G., Holland C.V., Wang T. [et al.]. Human toxocariasis. Lancet Infect Dis. 2018;18(1):14–24. DOI: https://doi.org/10.1016/S1473-3099(17)30331-6.Троценко О.Е., Иванова И.Б., Драгомерецкая А.Г. [и др.]. Актуальные вопросы геогельминтозов на территории Дальнего Востока России. Здоровье населения и среда обитания. 2016; 11(284): 37–40. EDN: WZTVCZTrocenko O.E., Ivanova I.B., Dragomerekaya A.G. [at al.]. Current issues of geohelminthiasis in the Russian Far East. Public health and habitat. 2016; 11(284): 37–40. EDN: WZTVCZ.Патент RU 2834042. Экспресс-тест на токсокароз и способы изготовления компонентов для его проведения. Заявитель: Новак М.Д, Евдокимова О.В. и др; опубл. 03.02.2025.Patent RU 2834042. Rapid test for toxocariasis and methods for manufacturing components for its implementation. Applicant: Novak M.D., Evdokimova O.V., et al.; published 03.02.2025. - in Russian.Болатчиев К. Х. Результаты эпизоотологического и эпидемиологического мониторинга по токсокарозу на юге России. Российский паразитологический журнал. 2019;13(4):17– 24. DOI: https://doi.org/10.31016/1998-8435-2019-13-4-17-24Bolatchiev K. H. Results of epizootological and epidemiological monitoring of toxocariasis in southern Russia. Russian Journal of Parasitology. 2019;13(4):17–24. DOI: https://doi.org/10.31016/1998-8435-2019-13-4-17-24.Марцев А.А. Паразитарные болезни человека во Владимирской области; 2023:137 с. ISBN 978-5-9984-1714-6Marcev A.A. Parasitic diseases of humans in the Vladimir region; 2023:137 s. ISBN 978-5-9984-1714-6.О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2022 году: Государственный доклад. М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и блага человека; 2023:368 с. ISBN 978–5–7508–2012–2O sostoyanii sanitarno-epidemiologicheskogo blagopoluchiya naseleniya v Rossijskoj Federacii v 2022 godu: gosudarstvennyj doklad. M.: Federal'naya sluzhba po nadzoru v sfere zashchity prav potrebitelej i blagopoluchiya cheloveka; 2023:368 s. ISBN 978–5–7508–2012–2 - in Russian.О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Хабаровском крае в 2021 году: государственный доклад. Хабаровск : Управление Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Хабаровскому краю; 2022:88On the state of sanitary and epidemiological well-being of the population in Khabarovsk Krai in 2021: state report. Khabarovsk: Office of the Federal Service for Surveillance on Consumer Rights Protection and Human Wellbeing for Khabarovsk Krai; 2022:88 - in Russian.Хроменкова Е. П. Санитарно-гельминтологическое обоснование мероприятий по охране окружающей среды как основа профилактики гельминтозов; 1992:16. EDN: ZLQVERKhromenkova E. P. Sanitary and helminthological substantiation of environmental protection measures as a basis for the prevention of helminthiasis; 1992:16.; 1992:16. EDN: ZLQVER.Хроменкова Е. П., Твердохлебова Т. И., Димидова Л. Л. Значимость паразитологических критериев безопасности объектов окружающей среды при санитарно-паразитологическом мониторинге. Дальневосточный журнал инфекционной патологии. 2015;29:87–90. EDN: VSUGIBKhromenkova E. P., Tverdokhlebova T. I., Dimidova L. L. The importance of parasitological safety criteria for environmental objects during sanitary and parasitological monitoring. Far Eastern Journal of Infectious Pathology. 2015;29:87–90. - in Russian.Конаныхина С.Ю. Клинико-иммунологические аспекты диагностики токсокароза у детей; 2004:168Konanykhina S. Yu. Clinical and immunological aspects of the diagnosis of toxocariasis in children; 2004:168 - in Russian.Маслянинова А.Е., Шандригос Ю. Д., Мазурина Е.О. [и др.]. Клинико-эпидемиологические аспекты токсокароза человека. Международный научно-исследовательский журнал. 2023; 11(137). DOI: https://doi.org/10.23670/IRJ.2023.137.Maslyaninova A.E., Shandrigos Yu. D., Mazurina E.O. [et al.]. Clinical and epidemiological aspects of human toxocariasis. International Research Journal. 2023; 11(137).DOI: https://doi.org/10.23670/IRJ.2023.137.107Краснов В. М. Токсокароз. Современные подходы к диагностике и лечению. Избранные лекции по педиатрии; 2001:75–83Krasnov V. M. Toxocariasis. Modern approaches to diagnosis and treatment. Selected lectures on pediatrics; 2001: 75–83 DOI: https://doi.org/10.23670/IRJ.2023.137.107.Сижажева А. М., Хулаев И. В., Шогенова Р. С. [и др.]. Лабораторная диагностика паразитарных инфекций с использованием современных методов исследования. Успехи современной науки. 2017;2(2):185–9Sizhazheva A. M., Khulaev I. V., Shogenova R. S. [et al.]. Laboratory diagnostics of parasitic infections using modern research methods. Advances in modern science. 2017;2(2):185–9 2017;2(2):185–9.Ермакова Л. А., Твердохлебова Т. И., Пшеничная Н. Ю. Диагностическая значимость иммуноферментного анализа при лар- вальных гельминтозах (трихинеллез, эхино- коккоз, токсокароз). Профилактическая и клиническая медицина. 2012;3(44):59–63. EDN: PUXHILErmakova L. A., Tverdokhlebova T. I., Pshenichnaya N. Yu. Diagnostic value of enzyme immunoassay in larval helminthiases (trichinellosis, echinococcosis, toxocariasis). Preventive and clinical medicine. 2012;3(44):59– 63.EDN: PUXHIL.Захарчук А. И., Бодня Е. И. Иммунодиагностика токсокароза. Паразитарные болезни человека, животных и растений; 2008:90–9Zakharchuk A. I., Bodnya E. I. Immunodiagnostics of toxocariasis. Parasitic diseases of humans, animals, and plants; 2008:90–9.Смирнова Д. Н., Крупина К. А., Богачева Н. В., Дармов И. В. Сравнительная оценка компонентов иммунохроматографических тест-систем, используемых для их разработки. Клиническая лабораторная диагностика. 2017;62(1):30-4.DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-1-30-34Smirnova D. N., Krupina K. A., Bogacheva N. V., Darmov I. V. Comparative evaluation of components of immunochromatographic test systems used for their development. Clinical laboratory diagnostics. 2017;62(1):30- 4.2017;62(1):30-4.DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-1-30-34.Новак М.Д., Новак А. И., Канина И.В. Разработка и применение иммунореагентов для сероэпизоотологического мониторинга. Международный научно-исследовательский журнал. 2022;1(115):47-50. DOI: http://dx.doi.org/10.23670/IRJ.2022.115.1.049Novak M.D., Novak A.I., Kanina I.V. Development and application of immunoreagents for seroepizootological monitoring. International research journal. 2022;1(115):47-50. DOI: http://dx.doi.org/10.23670/IRJ.2022.115.1.049.Новак М.Д., Новак А. И., Канина И.В. Применение иммунохроматографического метода для диагностики токсоплазмоза и токсокароза. Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. 2023;24:337- 42. DOI: http://dx.doi.org/10.31016/978-5-6048555-6-0.2023.24.337-342Novak M.D., Novak A.I., Kanina I.V. Application of the immunochromatographic method for the diagnosis of toxoplasmosis and toxocariasis. Theory and practice of combating parasitic diseases. 2023;24:337-42. DOI: http://dx.doi.org/10.31016/978-5-6048555-6-0.2023.24.337-342.Канина И.В., Новак А.И., Евдокимова О.В. [и др.]. Получение иммунодиагностических препаратов из антигенов Toxocara canis для серодиагностики токсокароза у человека. Инфекция и иммунитет. 2022;12(2):391–6].Kanina I.V., Novak A.I., Evdokimova O.V. [et al.]. Production of immunodiagnostic preparations from Toxocara canis antigens for serodiagnosis of toxocariasis in humans. Infection and Immunity. 2022;12(2):391–6.Długosz E., Wiśniewski M. Toxocara canis glycans influence antigen recognition by mouse IgG1 and IgM antibodies. Acta Parasitol. 2016;61(1):191-4. DOI: http://dx.doi.org/10.1515/ap-2016-0026.Długosz E., Wiśniewski M. Toxocara canis glycans influence antigen recognition by mouse IgG1 and IgM antibodies. Acta Parasitol. 2016;61(1):191-4. DOI: http://dx.doi.org/10.1515/ap-2016-0026.Fan C.K. Pathogenesis of cerebral toxocariasis and neurodegenerative diseases. Adv Parasitol. 2020;109:233-59. DOI:http://dx.doi.org/10.1016/bs.apar.2020.01.008.Fan C.K. Pathogenesis of cerebral toxocariasis and neurodegenerative diseases. Adv Parasitol. 2020;109:233-59. DOI:http://dx.doi.org/10.1016/bs.apar.2020.01.008.Ma G., Rostami А., Wang T. [et al.]. Global and regional seroprevalence estimates for human toxocariasis: A call for. Adv Parasitol. 2020;109:275-90. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/bs.apar.2020.01.011.Ma G., Rostami А., Wang T. [et al.]. Global and regional seroprevalence estimates for human toxocariasis: A call for. Adv Parasitol. 2020;109:275-90. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/bs.apar.2020.01.011.Badley J.E., Grieve R.B., Rockey J.H. [et al.]. Immune-mediated adherence of eosinophils to Toxocara canis infective larvae: the role of excretory-secretory antigens. Parasite Immunol.1987;9(1):133-43. DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1365-3024.1987.tb00494.x.Badley J.E., Grieve R.B., Rockey J.H. [et al.]. Immune-mediated adherence of eosinophils to Toxocara canis infective larvae: the role of excretory-secretory antigens. Parasite Immunol.1987;9(1):133-43. DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1365-3024.1987.tb00494.x.Menu E., Kopec L., Luciani L. [et al.]. Measurement of the IgG Avidity Index in the Diagnosis of Clinical Toxocariasis Patients. Pathogens.2021;10(9):108693.DOI:http://dx.doi.org/10.3390/pathogens10091086.Menu E., Kopec L., Luciani L. [et al.]. Measurement of the IgG Avidity Index in the Diagnosis of Clinical Toxocariasis Patients. Pathogens.2021;10(9):108693.DOI:http://dx.doi.org/10.3390/pathogens10091086.Harris N.L, Loke Р. Recent Advances in Type-2-Cell-Mediated Immunity: Insights from Helminth Infection. Immunity. 2017;47(6):1024-36.DOI:http://dx.doi.org/10.1016/j.immuni.2017.11.015.Harris N.L, Loke Р. Recent Advances in Type-2-Cell-Mediated Immunity: Insights from Helminth Infection. Immunity. 2017;47(6):1024- 36.DOI:http://dx.doi.org/10.1016/j.immuni.2017.11.015.Noordin R., Yunus M.H., Tan Farrizam S.N. [et al.]. Serodiagnostic methods for diagnosing larval toxocariasis. Adv Parasitol. 2020;109:131-52. DOI:http://dx.doi.org/10.1016/bs.apar.2020.01.003.Noordin R., Yunus M.H., Tan Farrizam S.N. [et al.]. Serodiagnostic methods for diagnosing larval toxocariasis. Adv Parasitol. 2020;109:131-52. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/bs.apar.2020.01.003.Morales-Ya´nez F., Marie T.S., Idalia H. [et al.]. Ultrasensitive detection of Toxocara canis excretory secretory antigens by a nanobody electrochemical magnetosensor assay. Anal Chem. 2019;91(18):11582-88. DOI:http://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.9b01687.Morales-Ya´nez F., Marie T.S., Idalia H. [et al.]. Ultrasensitive detection of Toxocara canis excretory secretory antigens by a nanobody electrochemical magnetosensor assay. Anal Chem. 2019;91(18):11582-88. DOI:http://dx.doi. org/10.1021/acs.analchem.9b01687.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.