Определение специфических антител к Toxocara canis у человека методом иммунохроматографического анализа

В статье описан способ получения иммунореагентов для серологической диагностики токсокароза человека методом иммунохроматографического анализа. Разработана тест-система для серологического скрининга популяции на токсокраоз иммунохимическим методом с использованием экскреторносекреторных антигенов личинок токсокар (патент №2834042 от 16.03.2023 RU). Предварительное получение образцов антигенных препаратов производилось путем оптимизирования условий культивирования личинок Toxocara canis с последующим получением антигена по согласно собственной методике. Высокоиммунные сыворотки в качестве иимунореагента получали от гипериммунизированных животных собственным антигенным препаратом в сочетании с адъювантом Фрейнда. При разработке тест-системы учитывали цель скрининга – определение антигенов или антител в исследуемом материале. С целью апробации иммунохроматографической тест-системы исследованы образцы сывороток крови клинически здоровых добровольцев (n=154). Согласно полученным результатам в 9 из 109 (8,2%) случаев среди взрослых людей и в 4 из 45 (8,8%) детских образцов сывороток выявлены антитела к токсокарам визуально наблюдаемые в виде поперечных темно-синих полос в тестовых зонах. Специфичность экспресс-теста подтверждается сходством результатов исследования в ИФА Воспроизводимость экспресс-теста демонстрирует точность методики, стабильность используемых компонентов и возможность ее использования в коммерческом производстве.

1. Давидянц В.А., Черникова Е., Лунгу В. Контроль и профилактика геогельминтозов в странах Европейского Региона ВОЗ. Сборник справочно-методических материалов. ВОЗ; 2017:5669. ISBN 978 92 890 5242 9

2. Ma G., Holland C.V., Wang T. [et al.]. Human toxocariasis. Lancet Infect Dis. 2018;18(1):14–24. DOI: https://doi.org/10.1016/S1473-3099(17)30331-6.

3. Троценко О.Е., Иванова И.Б., Драгомерецкая А.Г. [и др.]. Актуальные вопросы геогельминтозов на территории Дальнего Востока России. Здоровье населения и среда обитания. 2016; 11(284): 37–40. EDN: WZTVCZ

4. Патент RU 2834042. Экспресс-тест на токсокароз и способы изготовления компонентов для его проведения. Заявитель: Новак М.Д, Евдокимова О.В. и др; опубл. 03.02.2025.

5. Болатчиев К. Х. Результаты эпизоотологического и эпидемиологического мониторинга по токсокарозу на юге России. Российский паразитологический журнал. 2019;13(4):17– 24. DOI: https://doi.org/10.31016/1998-8435-2019-13-4-17-24

6. Марцев А.А. Паразитарные болезни человека во Владимирской области; 2023:137 с. ISBN 978-5-9984-1714-6

7. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2022 году: Государственный доклад. М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и блага человека; 2023:368 с. ISBN 978–5–7508–2012–2

8. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Хабаровском крае в 2021 году: государственный доклад. Хабаровск : Управление Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Хабаровскому краю; 2022:88

9. Хроменкова Е. П. Санитарно-гельминтологическое обоснование мероприятий по охране окружающей среды как основа профилактики гельминтозов; 1992:16. EDN: ZLQVER

10. Хроменкова Е. П., Твердохлебова Т. И., Димидова Л. Л. Значимость паразитологических критериев безопасности объектов окружающей среды при санитарно-паразитологическом мониторинге. Дальневосточный журнал инфекционной патологии. 2015;29:87–90. EDN: VSUGIB

11. Конаныхина С.Ю. Клинико-иммунологические аспекты диагностики токсокароза у детей; 2004:168

12. Маслянинова А.Е., Шандригос Ю. Д., Мазурина Е.О. [и др.]. Клинико-эпидемиологические аспекты токсокароза человека. Международный научно-исследовательский журнал. 2023; 11(137). DOI: https://doi.org/10.23670/IRJ.2023.137.

13. Краснов В. М. Токсокароз. Современные подходы к диагностике и лечению. Избранные лекции по педиатрии; 2001:75–83

14. Сижажева А. М., Хулаев И. В., Шогенова Р. С. [и др.]. Лабораторная диагностика паразитарных инфекций с использованием современных методов исследования. Успехи современной науки. 2017;2(2):185–9

15. Ермакова Л. А., Твердохлебова Т. И., Пшеничная Н. Ю. Диагностическая значимость иммуноферментного анализа при лар- вальных гельминтозах (трихинеллез, эхино- коккоз, токсокароз). Профилактическая и клиническая медицина. 2012;3(44):59–63. EDN: PUXHIL

16. Захарчук А. И., Бодня Е. И. Иммунодиагностика токсокароза. Паразитарные болезни человека, животных и растений; 2008:90–9

17. Смирнова Д. Н., Крупина К. А., Богачева Н. В., Дармов И. В. Сравнительная оценка компонентов иммунохроматографических тест-систем, используемых для их разработки. Клиническая лабораторная диагностика. 2017;62(1):30-4.DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-1-30-34

18. Новак М.Д., Новак А. И., Канина И.В. Разработка и применение иммунореагентов для сероэпизоотологического мониторинга. Международный научно-исследовательский журнал. 2022;1(115):47-50. DOI: http://dx.doi.org/10.23670/IRJ.2022.115.1.049

19. Новак М.Д., Новак А. И., Канина И.В. Применение иммунохроматографического метода для диагностики токсоплазмоза и токсокароза. Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. 2023;24:337- 42. DOI: http://dx.doi.org/10.31016/978-5-6048555-6-0.2023.24.337-342

20. Канина И.В., Новак А.И., Евдокимова О.В. [и др.]. Получение иммунодиагностических препаратов из антигенов Toxocara canis для серодиагностики токсокароза у человека. Инфекция и иммунитет. 2022;12(2):391–6].

21. Długosz E., Wiśniewski M. Toxocara canis glycans influence antigen recognition by mouse IgG1 and IgM antibodies. Acta Parasitol. 2016;61(1):191-4. DOI: http://dx.doi.org/10.1515/ap-2016-0026.

22. Fan C.K. Pathogenesis of cerebral toxocariasis and neurodegenerative diseases. Adv Parasitol. 2020;109:233-59. DOI:http://dx.doi.org/10.1016/bs.apar.2020.01.008.

23. Ma G., Rostami А., Wang T. [et al.]. Global and regional seroprevalence estimates for human toxocariasis: A call for. Adv Parasitol. 2020;109:275-90. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/bs.apar.2020.01.011.

24. Badley J.E., Grieve R.B., Rockey J.H. [et al.]. Immune-mediated adherence of eosinophils to Toxocara canis infective larvae: the role of excretory-secretory antigens. Parasite Immunol.1987;9(1):133-43. DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1365-3024.1987.tb00494.x.

25. Menu E., Kopec L., Luciani L. [et al.]. Measurement of the IgG Avidity Index in the Diagnosis of Clinical Toxocariasis Patients. Pathogens.2021;10(9):108693.DOI:http://dx.doi.org/10.3390/pathogens10091086.

26. Harris N.L, Loke Р. Recent Advances in Type-2-Cell-Mediated Immunity: Insights from Helminth Infection. Immunity. 2017;47(6):1024-36.DOI:http://dx.doi.org/10.1016/j.immuni.2017.11.015.

27. Noordin R., Yunus M.H., Tan Farrizam S.N. [et al.]. Serodiagnostic methods for diagnosing larval toxocariasis. Adv Parasitol. 2020;109:131-52. DOI:http://dx.doi.org/10.1016/bs.apar.2020.01.003.

28. Morales-Ya´nez F., Marie T.S., Idalia H. [et al.]. Ultrasensitive detection of Toxocara canis excretory secretory antigens by a nanobody electrochemical magnetosensor assay. Anal Chem. 2019;91(18):11582-88. DOI:http://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.9b01687.